Defesa de Tese de Doutorado — Bruno Gaia Bernardes

Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas

Bruno Gaia Bernardes

Desenvolvimento de vacina nanoestruturada contra SARS-CoV2 utilizando OMV de Neisseria meningitidis

Auditório da FCF

Presidente
Prof. Dr. Marcelo Lancellotti — FCF / Unicamp

Membros titulares
Profª Drª Daniele Ribeiro de Araujo — CCHN / UFABC
Prof. Dr. Paulo Vitor Farago — Defar / UEPG
Profª Drª Célia Regina Garlipp — FCM / Unicamp
Profª Drª Selma Giorgio — IB / Unicamp

Membros suplentes
Prof. Dr. Pedro Paulo Corbi — IQ / Unicamp
Profª Drª Adriana Knob — CEDETEG / Unicentro
Profª Drª Renata Kelly Mendes Valente — PUC-Campinas

Resumo

Introdução: As pandemias sempre trouxeram desafios novos e com isso uma nova visão sobre saúde coletiva e individual, como uso coletivo de máscara, uso de álcool em gel, necessidade da divulgação de informações confiáveis à população e do desenvolvimento, produção e distribuição de vacinas eficazes contra o patógeno. A pandemia do SARS-CoV2, que teve início entre o fim de 2019 e começo de 2020, alterou a necessidade mundial por diagnóstico rápido e preciso, para identificação e isolamento dos indivíduos infectados, bem como vacinação, definindo um oportunidade de inovação nas estratégias vacinais teorizadas porém ainda não utilizadas em larga escala, trazendo vacinas eficazes em um prazo nunca antes visto. O vírus SARS-CoV2, pertencente à Ordem Nidovirales, família Coronaviridae, subfamília Orthocoronavirinae e do subtipo β, assim como o SARS-CoV e MERS-CoV, responsáveis por causarem epidemias regionais. Objetivo: Neste trabalho buscamos produzir uma vacina nanoestruturada utilizando de OMV de N. meningitidis adsorvido com o vírus causador da covid-19. Visamos também a associação do vírus com nanopartículas de sílica mesoporosa Sba15 e Sba16 para descrição de seus efeitos na formulação vacinal. Material e métodos: Foram realizadas 3 formulações de vacina anti-SARS-CoV2, sendo elas OMV+SARS-CoV2, SBa15+SARS-CoV2 e SBa16+SARS-CoV2, onde o vírus foi cultivado em célula Vero E6 e posterior adição da nanopartícula e agitação orbital por 24 horas. Após a imunização dos camundongos, o efeito de soroneutralização dos anticorpos anti-SARS-CoV2 e a expressão de citocinas (IL2, IL4, IL10, IL23, INFγ, TGFβ e TNFα) através do RT-qPCR e a produção de IgG e IgM por ELISA. A caracterização da OMV e OMV+SARS-CoV2 foi realizada por Zetasizer, NTA e Microscopia Eletrônica de Varredura. Resultados e Discussão: No referente a expressão de citocinas, houve uma subexpressão da IL10, INFγ, TGFβ e TNFα, enquanto isso a IL2, IL4 e IL23 foram superexpressas. No teste ELISA, todas as formulações apresentaram alta quantidade de IgG total e IgG1, enquanto apenas a SBa15 apresentou alta quantidade de anticorpos IgM. O RT-qPCR do teste de soroneutralização indica que todas as formulações vacinais são capazes de neutralizar o vírus SARS-CoV2 em diluições de até 1/160. Foi possível distinguir o tamanho das OMVs em comparação com a OMV+SARS-CoV2, que aumenta seu volume após a associação. Conclusão: Todas as formulações aqui apresentadas possuem capacidade de indução de anticorpos neutralizante anti-SARS-CoV2, com semelhança no perfil de produção de anticorpo, neutralização viral e ativação do sistema imunológico do hospedeiro.