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SUMMARY:Defesa de Dissertação de Mestrado — Isamara Rodrigues Barbosa
DESCRIPTION:Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas \nIsamara Rodrigues Barbosa \nEnriquecimento de proteínas em saliva e fluido lacrimal utilizando óxido de grafeno por proteômica baseada em espectrometria de massas \nAuditório da FCF \nPresidente\nDrª Adriana Franco Paes Leme — LNBio / CNPEM \nMembros titulares\nProf. Dr. Antonio Riul Jr — IFGW / Unicamp\nDrª Bianca Alves Pauletti — LNBio / CNPEM \nMembros suplentes\nDrª Ana Lúcia Tasca Gois Ruiz — FCF / Unicamp\nDrª Leticia Marie Minatogau Ferro — LNBio / CNPEM \nResumo \nIntrodução: A proteômica baseada em espectrometria de massas permite identificar\, e quantificar proteínas em larga escala\, sendo estratégica para compreender processos biológicos. Entretanto\, com a ampla faixa dinâmica de concentração de matrizes complexas\, nem sempre é possível atingir a profundidade analítica. Os nanomateriais têm surgido como alternativa para enriquecimento proteico via formação de corona\, destacando-se o óxido de grafeno (GO) por sua alta área superficial\, grupos funcionais e afinidade por biomoléculas. Este estudo utilizou GO para enriquecimento de proteínas para ampliar a cobertura do proteoma de saliva e fluido lacrimal analisado por cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS). A caracterização da corona proteica por DLS\, AFM e FTIR indiciou aumento no diâmetro hidrodinâmico de 761.5 nm (S-PC) e 257.0 (T-PC)\, na morfologia de superfície de ~2.7nm (S-PC) e ~5 nm (T-PC) e modificações em grupos funcionais e o aparecimento de grupos de amida I\,II e III compatíveis com a adsorção proteica. A análise por LC/MS-MS em replicatas técnicas (n=3) revelou um ganhou ao número de proteínas identificadas e quantificadas\, especialmente para o proteoma da saliva\, sendo 1.662 proteínas na corona salivar (S-PC) e 421 na corona lacrimal (T-PC)\, em comparação a 1.468 e 416 nos fluidos sem tratamento com GO. Os agrupamentos hierárquicos mostraram perfis distintos separando perfeitamente os grupos entre proteínas adsorvidas e solúveis. Em acréscimo\, as proteínas enriquecidas na corona da saliva e no fluido lacrimal estão associadas a processos de resposta imune e a compartimento celulares como vesículas e grânulos secretores. Esses padrões reforçam subproteomas distintos entre os biofluidos \, refletindo diferenças nos mecanismos de secreção e função (valor de p ajustado < 0\,05). A anotação celular baseada em dados de RNAseq revelou enriquecimento em proteínas de células imunes\, sugerindo contribuição celular diferencial nos biofluido\, bem como\, potenciais marcadores de câncer. Os resultados demonstram o GO como estratégia eficiente para enriquecimento de proteínas de biofluidos que podem ser potenciais biomarcadores.
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SUMMARY:Colação de Grau — 2º semestre de 2025
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